Jurnal Internasional Kloning dan karakterisasi tyrosine decarboxylase yang terlibat dalam biosintesis galanthamine di Lycoris aurea

Download Jurnal Disini

Latar Belakang
               Galanthamine, salah satu jenis alkaloid Amaryllidaceae yang diekstraksi dari spesies Lycoris, digunakan dalam pengobatan penyakit Alzheimer. Sehubungan dengan kepentingan medis dan ekonomi, biosintesis dan mekanisme pengaturan metabolit sekunder di Lycoris tetap tidak diselidiki.
            
            
               Metode
               BLAST digunakan untuk mengidentifikasi urutan tyrosine decarboxylase dalam transkriptom Lycoris aurea (L’Hér) Herb. Aktivitas enzim dari TYDC ini ditentukan dengan menggunakan protein yang diekspresikan secara heterolog dalam sel Escherichia coli. Konten produktif terkait tyramine terdeteksi menggunakan High Performance Liquid Chromatography (HPLC). Menurut profil sekuensing RNA mikro yang tersedia dan database degradome L. aurea, microRNA396 diisolasi, yang menargetkan LaTYDC1 dan RNA Ligase-Mediated-Mediated-Rapid Amplification of cDNA Ends (RLM-RACE) digunakan untuk mengkonfirmasi pembelahan. Tingkat ekspresi miR396 dan LaTYDC1 diukur menggunakan reaksi rantai polimerase real-time kuantitatif (qRT-PCR).
            
            
               Hasil
               LaTYDC1 terutama diekspresikan dalam akar, umbi, daun dan bunga yang cocok dengan model untuk akumulasi galanthamine. Dekarboksilase ini secara efisien mengkatalisasi konversi tirosin menjadi tiamin. Di bawah perawatan metil jasmonate (MeJA), ekspresi LaTYDC1 dan kandungan tyramine meningkat tajam. Penggunaan RLM-RACE menegaskan bahwa miR396 mempromosikan degradasi mTNA LaTYDC1. Di bawah pengobatan MeJA, ekspresi miR396 ditekan sementara tingkat ekspresi LaTYDC1 meningkat tajam. Mengikuti peningkatan tingkat transkripsi miR396, LaTYDC1 secara signifikan ditekan.
            
            
               Kesimpulan
               LaTYDC1 berpartisipasi dalam biosintesis galanthamine, dan diatur oleh miR396. Temuan ini juga menyediakan strategi genetik untuk meningkatkan hasil galanthamine di masa depan.

Download Jurnal Disini
Jurnal

Kloning dan karakterisasi tyrosine decarboxylase yang terlibat dalam biosintesis galanthamine di Lycoris aurea